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WIWAM高通量植物表型平臺:干旱脅迫下擬南芥的生長研究

更新時間:2022-05-26 點擊量:2477

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在有限的水分條件下,擬南芥的存活和生長是不平等的

摘要:盡管耐旱性是植物研究的核心問題,但作物改良的可譯性相對較低。 在這里,我們報告了導致這種失敗的主要因素。 耐旱性主要基于在致死條件下提高的存活率進行評分,正如我們的研究所證明的那樣,在田間經常遇到的中度干旱下,不能預測*的生長性能,因此不能預測生物量產量的增加。

耐旱性是農業生物技術公司性狀研究的一個主要課題,已經發表了數千篇關于這一主題的學術論文。因此,有大量關于提高耐旱性的報道,主要是在模式植物擬南芥中。經典的基因工程方法涉及在植物用來避免和/或耐受干旱的機制中起作用的目標基因,如氣孔導度或滲透壓的產生。這些基因通常通過表達譜鑒定,包括信號成分和下游效應基因。然而,盡管在模式植物上的脅迫研究取得了明顯的成功,但這些發現很少應用于改善作物。只有少數基因可以增強模式植物或作物的抗逆能力,從而提高產量,而它們的分子機制目前還只是部分了解。其中一個關鍵原因與模式和作物物種之間的遺傳和生理差異有關。

在擬南芥的研究中,耐旱性主要是在相當嚴重的條件下進行評估的,在這種條件下,植物在長時間的土壤干燥后存活下來。然而,在溫帶氣候中有限的水分供應很少導致植物死亡,但限制了生物量和種子產量。為了研究干旱條件下存活與生物量增加之間的關系,我們在輕度脅迫試驗中分析了轉基因擬南芥植株的生長情況,這些植株對致死脅迫的耐受性增強。對擬南芥基因進行了廣泛的文獻篩選,以確定在功能獲得或喪失的情況下,擬南芥基因在對照條件下不受生長懲罰的情況下,賦予擬南芥抗逆性。雖然干旱和滲透脅迫被優先考慮,但其他相關的脅迫,包括鹽、熱和氧化脅迫,也被考慮在內。最終選擇由25個基因組成,我們將其命名為“脅迫耐受基因"(STG),涉及脅迫耐受的各個方面,并且在野生型Columbia-0(Col-0)背景中。

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圖1.在控制條件下,脅迫引起的生長減少與花環大小無關

我們在25個STG品系中的15個品系中添加了兩個以前未分析過的額外品系(MYB90和tAPX),這些品系已被證明在嚴重干旱時能更好地存活(圖1a)。為了量化STG系的生長開發了一種模擬相對溫和的干旱脅迫條件的分析方法,在這種條件下,隨著時間的推移,在土壤中生長的植物的花環大小會被跟蹤。為了確保測試的再現性,我們還在一個自動化平臺中使用了大量的植物,稱為“稱重成像和澆水機"(WIWAM;圖1b)。WIWAM實現了216株植物的日常成像和控制澆水。植物在對照條件下發芽和生長,直到第1.04階段,之后繼續對對照植物澆水,但對受脅迫植物停止澆水,直到達到設定的脅迫水平,并隨后保持恒定。在野生型植物中,漸進式土壤干燥導致生長速率逐漸降低,最終導致花環面積減少30–40%(圖1c)。

值得一提的是使用條件性或組織特異性啟動子8,9可能繞過觀察到的生長減少。一般來說,植物的大小和存活率,至少在實驗室條件下,被認為是負相關的,因為小型植物蒸騰和用水較少。相反,在我們的研究中輕度干旱導致的生長減少與對照條件下測得的STG大小無關(圖1d,e)

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